ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种广泛应用于生物医学领域的固相酶免疫检测方法，可以用于检测抗原或抗体。

ELISA的基本步骤

ELISA的检测过程主要分为以下几个步骤：

1. 首先，将已知的抗体或抗原结合在固相载体上，并保持其免疫活性。
2. 然后，将待检测样本与酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体上已吸附的抗体或抗原反应。
3. 接着，使用洗涤方法分离抗原-抗体复合物与游离成分。
4. 最后，加入酶的底物进行催化显色，从而完成定性或定量分析。

数据准确性与质量控制

进行ELISA检测的目的在于为实验提供准确的依据。为了保证实验数据的可靠性，必须坚持全面的质量控制，包括在收集样本之前制定完整的计划。

样本选择与干扰因素

在ELISA试验中，血清是常用的样本，血浆可视为与血清同等有效。然而，样本可能导致假阳性或假阴性结果的干扰物质可以分为内源性和外源性两类。

1. 内源性物质

研究表明，约有40%的人血清中含有非特异性干扰物质，这些物质可能会对检测结果产生不同程度的影响。常见的干扰物质包括类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体等。

常见的干扰物质及解决方案：

• 类风湿因子：人血清中的IgM、IgG型类风湿因子可能与ELISA系统中的抗体结合，导致假阳性。解决方案包括更换为F(ab)2形式的抗体或热变性处理样本。
• 补体：在ELISA反应过程中，补体C1q可能形成连接，导致假阳性。解决方案为使用EDTA稀释样本。
• 嗜异性抗体：来源于人类血清的天然嗜异性抗体可能导致假阳性。可通过在样本稀释液中加入过量的动物Ig克服。

2. 外源性物质

外源性物质往往由于不当的样本采集和存储而产生，如样本溶血或细菌污染，均会对ELISA测定造成干扰。

外源性物质干扰及应对措施：

• 样本溶血：红细胞破坏时释放出的血红蛋白可能导致非特异性显色。应加强采集时避免溶血。
• 细菌污染：被污染的样本可能含有内源性辣根过氧化物酶，对测定结果造成影响。因此，确保样本采集的无菌操作至关重要。

结论

在进行ELISA检测时，需深入分析试剂和操作因素外的样本因素，以排除干扰，从而为临床提供正确可靠的检测结果。应用PG电子的创新技术，更能提高ELISA检测的效率与准确性，为生物医学研究提供更可靠的支持。