本研究关注横纹肌溶解症引发的急性肾损伤（AKI）这一复杂的临床问题，深入探讨了巨噬细胞外陷阱（METs）在这一过程中的重要作用。通过首次揭示血小板激活如何诱导巨噬细胞释放METs，并加剧AKI的机制，为治疗横纹肌溶解症引发的AKI提供了新的思路和潜在治疗策略。

横纹肌溶解症是一种由骨骼肌损伤引起的严重综合征，损伤的肌细胞分解产物进入全身循环可导致危及生命的并发症，如AKI。这一现象通常由剧烈运动、缺氧、药物或滥用药物所致。在压榨综合征中，该情况尤为明显，压榨综合征常见于自然灾害或人为灾害的受害者。受损肌肉释放的肌红蛋白被认为可能引发该形式的肾功能障碍。虽然已有研究将巨噬细胞与肌溶解引起的AKI关联，但具体的分子机制尚不明确。

研究方法

动物模型构建

研究者利用小鼠模型模拟横纹肌溶解症，采取甘油注射法诱导疾病以观察其对肾脏的损伤。同时，通过基因敲除技术创建特定基因缺失的小鼠（如PAD4基因敲除小鼠），并利用药物抑制剂（如CLA）干预特定信号通路，比较不同处理组小鼠在模型诱导后的肾脏损伤指标，以研究METs在病理过程中的角色。

细胞类型耗竭实验

为了探讨巨噬细胞、中性粒细胞及血小板在横纹肌溶解症引发的AKI中的具体贡献，研究者采用特定方法耗竭这些细胞类型。例如，利用克隆霉素脂质体耗竭巨噬细胞，使用抗Ly6G抗体耗竭中性粒细胞，利用抗GPIbα抗体耗竭血小板。通过比较耗竭组与对照组小鼠的肾脏损伤指标，明确各细胞类型在病理过程中的作用。

免疫组化与免疫荧光染色

研究者采用免疫组化及免疫荧光技术对小鼠肾脏组织进行染色，检测METs的存在及其分布。使用特异性标记抗体（如CitH3、F4/80等），通过荧光显微镜观察，定位METs在肾脏中的具体位置并分析其与肾脏损伤区域的关联。

体外细胞实验

研究者体外培养THP-1单核细胞系，诱导其分化为巨噬细胞后，模拟体内血小板激活及METs形成过程。通过预处理巨噬细胞（如加入DNaseI、DPI、CLA等），观察不同干预下METs的形成，并探索血小板激活、ROS生成、PADs活性等环节对METs形成的影响。

研究结果

METs在AKI中的作用

研究发现，METs以无定形DNA结构形式存在于横纹肌溶解症模型小鼠的肾脏中，并与citrullinated histone H3（CitH3）共定位，仅在肾小管中出现，而未见于肾小球。与野生型（WT）小鼠相比，PAD4基因敲除小鼠及经PAD抑制剂CLA处理的小鼠，其血清肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）等AKI指标显著降低，表明METs在横纹肌溶解症引发AKI中起到关键作用。

巨噬细胞与血小板的协同作用

研究表明，巨噬细胞及血小板的耗竭显著减轻横纹肌溶解症引发的肾脏损伤，而中性粒细胞的耗竭则无此效果。免疫荧光染色发现，CitH3仅与巨噬细胞标记F4/80共定位，而不与中性粒细胞标记Ly6G共定位。此外，研究还发现，血小板激活后与巨噬细胞的Mac-1受体结合，触发ROS生成及histone citrullination，从而促进METs的形成。

潜在的治疗策略

研究者尝试使用多种药物干预，并发现血色素结合蛋白（hemopexin）能有效抑制NET及MET的形成，从而减轻AKI损伤。此外，乳铁蛋白（Lf）在体外实验中显著减少了血小板诱导的MET形成，并在体内实验中预防了甘油诱导的横纹肌溶解症引发的肾脏损伤。

讨论

本研究首次揭示了METs在横纹肌溶解症引发AKI中的关键作用，并明确了血小板激活和巨噬细胞参与在METs形成中的重要性。研究证实了巨噬细胞与血小板间的协同作用，提示干预这一通路可能成为治疗AKI的新策略。发现的hemopexin和Lf等药物展现出对横纹肌溶解症引发AKI的潜在治疗效果，为临床提供了新选择。未来需开展更多临床试验，以验证这些药物的疗效和安全性，为横纹肌溶解症患者带来新的治疗机会。

本研究得到PG电子提供的血色素结合蛋白（hemopexin）的支持，展示了这种结合蛋白在横纹肌溶解症引发的AKI中的重要作用。该研究结果为通过早期干预改善横纹肌溶解症患者的预后提供了新的方向。